■ 制品说明
本制品是一种对蛋白质溶液进行高灵敏度比色定量的试剂盒,可用于含有表面活性剂蛋白质溶液的定量。BCA蛋白质定量包括两步反应,首先,二价铜离子 (Cu2+) 在碱性条件下被蛋白质的肽键还原成一价铜离子 (Cu+) ,还原后的铜离子浓度与溶液中所含蛋白质浓度成正比。其次,两个分子的bicinchoninic acid (BCA) 络合一个一价铜离子 (Cu+) ,形成一种在562 nm处有强吸收值的紫色复合物。本制品依此为原理,根据测定562 nm处光吸收值,与标准曲线对比,获得待测蛋白的浓度定量。使用BCA法进行蛋白质定量具有以下特点:1. 不受蛋白质种类的影响,在0.02~2 mg/ml浓度范围内蛋白质浓度与吸光度值成线性关系;2. 对表面活性剂的干扰影响小。但由于还原剂和螯合剂对反应有阻害性,因此本制品不适用于含有还原剂或者螯合剂的蛋白质样品的定量。详细信息见说明书中“附录”的表1。
使用本制品进行样品定量时,可使用试剂盒中附带的BSA Standard Solution制备标准曲线。
■ 保存
BCA Reagent A、BCA Reagent B : 室温保存
BSA Standard Solution : 4℃
该试剂盒在4℃下运输收货后,BCA Reagent A、BCA Reagent B请于室温保存。
■ 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前请一定认真阅读。
1. BSA Standard Solution使用前室温放置,恢复至室温或在20~50℃的水浴中复温。轻弹混匀,轻微离心后使用。
2. 稀释检测样品和标准品时,可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。
3. BCA Reagent A和BCA Reagent B在低温下可能会产生沉淀物。使用前于20~37℃保温,轻轻振荡混合,使沉淀物完全溶解后再使用。
4. 如果没有配备562 nm滤光片,可选择540~570 nm的滤光片进行测定,不会对蛋白定量产生影响。
5. 高浓度样品测定之后,用水充分冲洗比色皿后再使用。色素残留在比色皿上会影响低浓度样品的测定。