■ 制品内容 (Code No.: 2313A)
Recombinant RNase Inhibitor (40 U/μl) 5,000 U
■ 制品说明
本制品是通过亲和色谱等方法从大肠杆菌中纯化的猪肝RNA酶抑制剂得到的重组体。该酶的特征与猪肝和人胎盘来源的此类酶相似，与RNase A形成1：1复合体，抑制RNase活性。该反应是可逆的，通过尿素及巯基类试剂能够解离复合体，使RNase复活而抑制剂不可逆失活。使用时可直接加入含有RNA的反应液中。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂 (核酸类、无机磷酸类) 不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。但不能抑制反转录酶的RNase H的活性。本品具有与猪肝和人胎盘来源的酶相同的应用。
■ 保存
-20℃。
■ 起源
E. coli containing a plasmid that carries the porcine liver RNase Inhibitor gene.
■ 活性定义
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。(抑制活性通过抑制RNase A水解Cyclic2’,3’-CMP的能力确定) 。
■ 性质
分子量：约52,000
等电点：5.0
最适pH：pH6～9
最适温度：25℃～50℃
激活剂：还原剂DTT（贮存Buffer中至少含有1 mM DTT，以保护处于游离状态的-SH）。
稳定性：起泡或剧烈搅拌 (Vortex等) 可能会引起失活。65℃热处理15分钟可使其失活。
■ 使用注意
1. 抑制RNase活性的pH值范围较广，在pH7～8时表现最适范围。
2. RNase Inhibitor发挥活性作用需要至少1 mM的DTT。
■ 用途
1. cDNA合成反应 (Ribonuclease Inhibitor, 反应量0.5 U/μl) 。
2. 体外翻译 (Ribonuclease Inhibitor, 反应量1 U/μl) 。
3. 体外无细胞系统转录 (Ribonuclease Inhibitor, 反应量20 U/μl) 。
4. SP6或T7 RNA聚合酶的体外转录 (Ribonuclease Inhibitor,反应量1 U/μl) 。
5. 多核糖体分离(RNase Inhibitor，反应量1 U/μl)。