■ 制品内容
Lysis Buffer for Microorganism to Direct PCR 1 ml × 5支
■ 制品说明
本制品是一种能够快速裂解大部分细菌、真菌等微生物,使其释放核酸,然后直接用于各种PCR检测反应的试剂。各种细菌、真菌等微生物已经成为现阶段分子生物学研究领域的重要材料,但对于这些微生物的鉴定和筛选比较耗时费力,传统的方法需要提取基因组DNA,然后再进行PCR检测,这种方法得到的结果较为准确,但操作复杂,需要的菌体量大,且容易造成样品间的相互污染。也有一些使用热变性的方法对大肠杆菌等细菌直接进行检测的方法,但其应用范围较小,对于大部分真菌以及细胞壁较厚的革兰氏阳性细菌并不适用。
本制品可以对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、酵母菌、霉菌等大部分微生物进行裂解,释放其基因组DNA,所得的裂解液可直接用于PCR反应,省去了提取基因组DNA的操作,节省时间,减少了样品之间的污染,能够达到微生物快速PCR检测的目的。
■ 保存
室温。
■ 注意事项
1. 操作注意
① 本试剂具有一定的腐蚀性,使用时应戴手套、眼镜,避免液体溅到身体上,如不慎溅到皮肤上,应立即用大量清水冲洗。
② 菌体的取量会影响实验结果。平板上的菌落用牙签或灭菌枪头挑取即可,液体培养的菌丝应取一毫米左右。
③ 裂解后,作为PCR反应的模板加量不应超出PCR反应体系的1/10 (V/V)。
2. 本试剂在温度较低时,溶液中可能会出现分层或絮状沉淀,使用前请于37℃水浴中加热并混匀。
3. 本制品为悬浊液,使用前应充分混匀。
4. 本试剂保存一段时间后颜色会变浅,此为正常现象,不影响实验结果。
5. 本试剂适用的微生物种属请见附表。不在其中的微生物,本试剂不承诺可以有效裂解。
6. 裂解上清液适用于TaKaRa Ex Taq、TaKaRa LA Taq以及 Premix Taq (Ex Taq Version 2.0) 的反应体系,其它PCR反应体系未进行评价,不承诺一定能够进行有效扩增。