■ 制品内容
E. coli MV1184 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium 2% tryptone
0.5% yeast extract
10 mM NaCl
2.5 mM KCl
10 mM MgSO4
10 mM MgCl2
20 mM Glucose
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan's method基础上进行了改良,制备出E.coli MV1184 Competent Cells,当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时,转化效率可达1×107 cfu/μg。
E.coli MV1184宿主具有琥珀突变抑制因子,只允许没有发生琥珀突变的载体进行复制,可以用作琥珀突变DNA的选择宿主。同时本宿主含有F’质粒,也可作为M13 phage载体DNA的宿主菌,制备单链DNA。此外,本宿主在使用pUC系列质粒载体或M13 phage载体进行转化或转染时,具有α-互补性,可以通过在培养基中加入X-Gal 和 IPTG进行蓝白筛选。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
■ Genotype
E. coli MV1184:ara,△(lac-proAB),rpsL, thi (Φ80lacZ△M15), △(srl-recA) 306::Tn10 (tet r) / F' [traD36, proAB+, lac Iq, lacZ△M15]
■ 保存
-80℃。
注意: 如果不在-80℃下保存,转化效率将会降低。此时,在使用前,请使用附带的pUC119 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
■ 转化效率
按照“质粒载体转化”的使用方法,使用1 ng 的pUC119转化到100 μl E. coli MV1184 Competent Cells中,在含有氨苄青霉素的LB平板上筛选,转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119。