描述:
含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、呈金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含三价铁的含铁血黄素。普鲁士蓝(Perls)是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法。其染色原理为:亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁氰化钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝。该反应被称为普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色。三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物,在反应后可用多种红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。Perls 染色液稳定性好、可长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。本试剂盒的复染液为中性红染液。Perls stain常用于显示局部组织内各种出血性病变,常见于吞噬细胞内或间质内,判断含铁血黄素沉积。
原理:
亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁氰化钾反应, 生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝。用于显示含铁血黄素。
适用范围:
用于显示局部组织内各种出血性病变,判断含铁血黄素沉积。
组成:
1. Perls 染液 (A、B液各50mL) 2. 伊红染色液 100mL
储存:
密闭,室温,避光保存12个月。
样本处理:
1. 石蜡切片:需脱蜡至水。
(1) 脱蜡:二甲苯I、II分别脱蜡5~10分钟。
(2) 脱水:无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇脱水3-5分钟。
(3) 蒸馏水洗3次,每次3分钟。
2. 冷冻切片:
(1) 多聚甲醛10分钟
(2) 蒸馏水洗3次,每次3分钟
染色步骤:
1. 切片脱蜡至水,蒸馏水洗。
2. 入Perls 染液中染色10-20分钟。蒸馏水洗。
3. 伊红染色液复染细胞。蒸馏水洗。
4. 梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。
染色结果:
含铁血黄素呈蓝色,其他组织呈复染颜色。
说明:
1. 临用前取Perls 染液 的A、B液等量混合,即为普鲁士蓝铁液,现配现用。
2. 操作过程中容器要干净,避免用金属铁质,清洗切片和容器时用蒸馏水,因普通水内含铁质。
3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验,镜下观察染色和分色情况,确定合适的染色时间。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。